动态评价联合检测乙肝病毒前S1抗原与核心 抗原的临床意义

长期以来HBV DNA 是判定乙肝患者是否具有病毒复制及传染性的金标准。近年来由于HBV 变异株的出现‚导致 HBeAg （－）、HBV DNA （＋）的慢性乙肝患者所占比例较前明显升高。从而降低了 HBeAg 作为临床上评价病毒复制的价值。有实验数据显示：采用双抗体夹心 ELISA法联合检测HBV前S1和核心抗原其检测结果和荧光定量PCR检测结果符合率较高，并能有效检出由于前C基因变异导致的 HBeAg （－）、HBV DNA （＋） 和 S 基因“a”表位变异导致的 HBsAg（－）的乙肝患者。

为进一步探讨联合检测HBV前S1和核心抗原的临床意义，有研究对100例慢性乙肝患者的系列血清进行了检测，以探讨其临床应用价值。

该研究收集2007年6月～2008年5月医院住院的100例慢性乙肝患者（男68，女32）的系列血清共346份，年龄18～70岁，平均（44±8）岁。系列血清入选标准：FQ-PCR 检测 HBV DNA ＞104 copies／ml，ALT 为80～200U／L，既往未行抗病毒治疗（包括核苷类似物及干扰素），现拟以核苷类似物抗病毒治疗。采集患者用药前1次和用药后连续至少2次，采集间隔（10±3）d。46例不明原因肝功能不良患者血清标本（男29，女17）。

未分型肝炎入选标准：经检测HBsAg（－）抗-HCV（－），抗-HAV （－），抗-HEV（－），肝功能反复异常＞6月。排除慢性酒精性肝炎，非酒精性脂肪肝，药物性肝炎，自身免疫性肝病，遗传性肝病等。正常对照血清486份，来自感染科门诊和体检中心，均经ELISA法检测为 HBsAg（－），FQ-PCR检测 HBV DNA＜103 copies／ml。标本采集方法：空腹条件下抽取静脉血 5ml，4000r／min离心10min，分离血清1～2ml－70℃下保存，半年内检测。

临床上常通过检测乙肝血清标志物尤其是 HBsAg 和 HBeAg来判断病毒的复制情况。近年来随着乙肝疫苗、核苷类似物的长期临床应用，出现部分病毒基因组前C区或 C 区启动子变异致使HBeAg的形成和分泌发生障碍。形成一部分HBeAg阴性而体内仍然存在病毒复制的慢性乙肝患者。

据报道亚洲地区平均50％的HBeAg 阴性的慢性乙肝患者存在C区突变。并且证实此类患者更易发展至慢性乙肝部分最终可演变为肝硬化甚至肝癌。有报道证实利用生物探针杂交法检测，发现乙肝病毒前S1抗原的表达与 HBcAg，HBVDNA的表达相平行。前S1抗原主要存在于 Dane 颗粒区带，是HBV 外膜蛋白最前端的一部分。有研究报道前 S1抗原与HBV的复制指标具有较好的一致性，并且前 S1抗原在患者血清的阳性率可达75％。通过对乙肝病毒前S1抗原的检测可间接的反映患者体内HBV 的复制情况，却不能避免由于 HBsAg“a”抗原表面的变异而导致的 HBsAg（－），HBV DNA（＋）乙肝患者的漏检。

乙肝病毒核心抗原（HBcAg）是Dane颗粒的重要结构蛋白，其血清内含量浓度与HBV DNA含量高度相关。通过对 HBcAg进行检测，可弥补乙肝病毒前S1抗原由于变异而导致的漏检现象。本研究中342份 HBV DNA（＋）的血清中仅 37．4％为 HBeAg 阳性，而 HBV NRAg 检测的灵敏度达98．8％。此外通过对 HBV NRAg 和荧光定量 PCR 这两种方法进行比较，证实具有较好的一致性，总符合率达到97．3％（Kappa 值0．945）。表明 HBV NRAg 对于判定乙型肝炎患者体内病毒是否复制优于 HBeAg与 HBV DNA 具有相似的临床 价值。



同时研究结果显示 HBV DNA 拷贝数与 HBV NRAg OD 具有一定的相关性（ r＝0．721）。 提示虽然 HBV NRAg 检测为一种HBV DNA 定性检测方法，但可以通过分析其OD值的变化，对动态监测抗病毒疗效有一定的临床指导意义。本研究还发现HBV DNA阴性时HBV NRAg 检测的阳性率较 HBV DNA 阳性时有明显下降。 可能是随着抗病毒药物的使用，虽然 HBV DNA 并未阴转，但大部分已接近临界值，故检出率降低。此外对46例未分型肝炎患者血清标本进行检测，发现有3份 HBV NRAgOD 值为弱阳性。后经多区段巢式 PCR 检测证实，为 HBsAg（－）HBV DNA （＋）的乙肝患者。可能是 HBV DNA 低水平感染，导致抗原量过低或先天S基因和或前 C 区变异等引起。

综上所述，对乙肝患者进行乙肝病毒前S1抗原和核心抗原的联合检测，不仅能准确的反映患者体内的病毒复制情况，而且能对部分变异株进行有效的筛查。对于目前HBV DNA定量检测尚未普及的情况下，可以补充常规以乙肝全套作为评价感染 性的一些不足，在同等意义上讲可以运用 HBV NRAg 来替代 HBV DNA 检测判定其感染性。