IVF 实验室自动化时代来临：利用自动化设备进行标准化程序的玻璃化冷冻和解冻，已在小鼠和牛的动物模型实现

-转自默克ART在线

女性选择推迟做母亲或丧失生育能力的医源性风险，使玻璃化卵母细胞的临床需求稳步增长。 

但是，由于缺乏标准化的玻璃化冷冻/解冻方案，使不同 ART 中心的存活率、妊娠率和活产率差异较大。目前，大部分的玻璃化冷冻/解冻方案需要在完成操作前在各种溶液 (通常 4 或 5 种) 之间人工、手动操作移动卵母细胞或胚胎。

那么，是否能用同一台自动化设备进行标准化程序的玻璃化和解冻？这是众多 ART 临床和实验室专家所共同关心的问题。

日前，美国科学家采用小鼠 (40 枚卵母细胞和 242 个分裂胚胎) 和牛 (234 枚卵母细胞和 55 个分裂胚胎) 标本，用一台新型自动化设备 (Sarah，FertilSafe 公司) 玻璃化冷冻/解冻处理研究试验。

小鼠卵母细胞 (n = 40) 和胚胎 ( 8 细胞，n = 35；囊胚，n = 165) 和牛胚胎 (2Pn，n = 35) 和 MII 卵母细胞 (n = 84) 采用自动化设备 (Sarah) 进行玻璃化。共有 42 个小鼠胚胎 (2 细胞期) 和 20 个牛胚胎 (2Pn) 和 150 个牛 MII 卵母细胞作为新鲜对照并生长至囊胚。用同一台设备解冻，评估所有的存活率、卵裂率、囊胚率和孵化率。

最多 5 个卵母细胞/胚胎装载入 0.25 ml 吸管，末端用特殊的胶囊封闭，并与机械臂相连。小鼠实验中，标本暴露于 3 种 ES (30、60、100%) ，后为对照 (100%) 。牛的实验中，标本暴露于 6 种 ES (10、20、40、60、80、100%) ，后为对照 (75、100%) 。

解冻时，将吸管浸入控温 5 ml 试管 (含 WS 100、50、25 和 12.5%) ，在到达中转站前分别在室温 (RT) 下解冻各 2.5 分钟。95% (38/40) 的小鼠 MII 卵母细胞仍为等渗体积，所有 (95/95，100%) 均存活。

解冻的 8 细胞小鼠胚胎的囊胚形成率为 95% (33/35) ，孵化率为 80% (28/35) 。解冻的小鼠囊胚存活率为97% (160/165) ，孵化率为 81% (135/165) 。新鲜对照小鼠胚胎的囊胚形成率为 100% (42/42) ，孵化率为 73% (21/42) (p = ns) 。牛胚胎的存活率为 100% ，卵裂率为 54% (19/35) ，且 9% (3/35) 到达囊胚期。新鲜对照牛胚胎的卵裂率为 65% (13/20) ，囊胚率为 20% (4/20) 。玻璃化冷冻/解冻牛卵母细胞的存活率为 100%，卵裂率为 73% (61/84) ，囊胚率为 7% (6/84) ；新鲜对照的卵裂率为 83% (125/150) ，囊胚率为 11% (17/150) (p = ns) 。

以上研究数据表明，经过自动化玻璃化冷冻/解冻设备（Sarah）处理的卵母细胞/胚胎存活率非常高，该新设备将成为 IVF 实验室标准化和自动化不可或缺的设备。但需要注意的是，在动物模型取得的这些成功的初步结果，应在人类 IVF 临床上开展复制实验。

卵母细胞和胚胎的自动化玻璃化冷冻和解冻，将迅速把全世界 ART 中心之间的存活率和成功率差异减小。简化和标准化方案将对需要保存生育力或择期冻存的患者具有重大价值，对整个 ART 行业也具有重大价值。

来源：ESHRE 2018 Oral 277: Automation in the IVF laboratory: preliminary results with a new device able to do both vitrification/rewarming of mice and bovine oocytes and embryos.